中 国 采 选 技 术 十 年 回 顾 与 展 望 浸矿细菌的复合诱变选育及浸出含铜尾矿的研究 董 颖 博 ꢀ 林 ꢀ 海 ꢀ 许 晓 芳 ꢀ 周 闪 闪 （ １． 北 京 科 技 大 学 土 木 与 环 境 工 程 学 院 ； ２． 金 属 矿 山 高 效 开 采 与 安 全 教 育 部 重 点 实 验 室 ） 摘 ꢀ 要 ꢀ 以 自 主 分 离 的 优 势 浸 矿 菌 种 Ａｔ． ｆＬＤ１ 为 原 始 菌 ， 采 用 微 波 处 理 和 化 学 药 剂 对 其 进 行 了 微 波 — 化 学 复 合 诱 变 ， 重 点 研 究 了 复 合 诱 变 对 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 生 长 、 氧 化 活 性 以 及 含 铜 尾 矿 浸 出 体 系 的 影 响 。 结 果 表 明 ， 微 波 — 化 学 复 合 诱 变 能 使 菌 种 产 生 明 显 变 异 ， 能 很 好 提 高 菌 种 氧 化 活 性 和 生 物 浸 出 能 力 。 复 合 诱 变 菌 在 ９ Ｋ 培 养 基 中 ， ２４ ｈ ２ ＋ ２ ＋ 后 Ｆｅ 氧 化 率 达 到 １００％ ， 而 在 相 同 条 件 下 ， 原 始 菌 的 Ｆｅ 氧 化 率 达 到 １００％ 则 需 ４８ ｈ； 在 含 铜 尾 矿 浸 出 体 系 中 ， 浸 出 ３０ ｄ 时 ， 铜 浸 出 率 为 ３４． ２０％ ， 比 原 始 菌 提 高 了 ３１． ５％ ， 到 达 浸 出 终 点 的 时 间 比 原 始 菌 提 前 了 ５ ～ ８ ｄ， 充 分 表 明 复 合 诱 变 菌 浸 出 含 铜 尾 矿 的 性 能 得 到 了 很 大 提 高 。 关 键 词 ꢀ 含 铜 尾 矿 ꢀ 细 菌 浸 出 ꢀ 复 合 诱 变 ꢀ 铜 浸 出 率 ꢀ ꢀ 铜 是 重 要 的 有 色 金 属 ， 随 着 国 民 经 济 的 发 展 ， 对 － 氟 尿 嘧 啶 的 复 合 处 理 ， 分 离 得 到 了 变 异 菌 株 １６０， 土 霉 素 产 量 比 原 菌 株 有 所 提 高 。 ②同 一 种 诱 变 因 素 连 续 重 复 使 用 ， 即 将 一 次 处 理 后 的 菌 液 进 行 培 养 繁 殖 后 ， 再 行 处 理 ， 反 复 数 次 后 ， 最 后 进 行 分 离 筛 选 。 ③先 后 用 两 种 或 两 种 以 上 诱 变 因 素 进 行 交 替 处 理 。 普 遍 认 为 ， 复 合 诱 变 具 有 协 同 效 应 ， 两 种 或 两 种 以 上 诱 变 剂 合 理 搭 配 使 用 的 复 合 诱 变 较 单 一 诱 变 效 果 铜 的 需 求 量 逐 年 增 加 ， 国 内 铜 的 供 求 矛 盾 十 分 突 出 。 在 铜 工 业 中 ， 由 于 铜 矿 石 开 采 品 位 逐 年 下 降 、 难 选 冶 铜 矿 石 类 型 和 数 量 增 多 ， 导 致 传 统 的 选 别 方 法 难 以 从 中 经 济 有 效 地 回 收 铜 ， 而 采 用 细 菌 浸 出 技 术 回 收 铜 ， 经 济 效 益 显 著 １］ 。 但 目 前 微 生 物 浸 铜 技 术 因 其 还 存 在 一 系 列 的 问 题 在 工 业 上 的 推 广 和 应 用 并 不 广 ［ WWW.KY114.CN ２］ ， 因 此 研 究 特 性 高 效 浸 矿 菌 株 显 得 尤 为 重 要 。 好 。 泛 ， 如 缺 乏 优 良 浸 矿 菌 种 、 反 应 周 期 长 、 浸 出 率 低 ［ 等 本 研 究 以 湖 北 大 冶 铜 山 口 尾 矿 作 为 研 究 对 象 ， 以 本 实 验 室 已 开 发 出 的 优 良 浸 出 铜 尾 矿 菌 种 Ａｔ． ｆＬＤ１ 作 为 出 发 菌 株 ， 在 研 究 了 紫 外 诱 变 、 微 波 诱 变 、 化 学 诱 变 ３ 种 单 一 诱 变 对 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 活 性 和 浸 在 浸 矿 菌 种 育 种 方 面 ， 国 内 外 都 做 了 大 量 研 究 ， 主 要 选 育 方 法 包 括 菌 种 的 驯 化 、 诱 变 和 基 因 工 程 ［ ３］ 。 由 于 驯 化 育 种 和 基 因 工 程 育 种 还 存 在 一 定 的 劣 势 ［ ４］ ， ［ ７９］ 矿 效 率 影 响 的 基 础 上 ， 选 择 效 果 较 好 的 ２ 种 诱 变 因 此 诱 变 育 种 便 成 为 目 前 对 浸 矿 菌 种 进 行 性 能 改 良 的 首 选 方 法 。 通 常 采 用 物 理 、 化 学 和 生 物 因 素 对 微 生 物 进 行 诱 变 处 理 ， 使 微 生 物 体 内 的 遗 传 物 质 ＤＮＡ 发 生 改 变 ， 以 提 高 突 变 频 率 和 扩 大 遗 传 变 异 的 幅 度 ， 然 后 从 中 筛 选 出 有 利 于 生 产 的 变 异 菌 株 。 方 法 和 诱 变 剂 量 （ 即 ： 微 波 辐 射 处 理 ６０ ｓ ＋ 盐 酸 羟 胺 浓 度 １％ ） 进 行 Ａｔ． ｆ ＬＤ１ 菌 的 复 合 诱 变 ， 主 要 考 察 了 复 合 诱 变 对 菌 种 生 长 繁 殖 、 氧 化 活 性 以 及 铜 浸 出 效 率 的 影 响 。 １ ꢀ 试 验 在 微 生 物 的 诱 变 选 种 中 ， 很 多 研 究 者 注 意 到 虽 然 各 种 物 理 化 学 诱 变 因 素 具 有 不 同 的 诱 变 频 率 ， 但 有 效 的 突 变 还 是 出 现 得 不 多 ， 因 此 在 实 际 生 产 中 多 采 用 几 种 诱 变 剂 复 合 处 理 、 交 叉 使 用 的 方 法 进 行 菌 株 诱 变 ５］ 。 夏 乐 先 等 对 比 了 紫 外 诱 变 、 微 波 诱 变 、 紫 外 － 微 波 复 合 诱 变 ３ 种 不 同 方 法 诱 变 菌 种 对 闪 锌 １ ． １ꢀ 菌 种 及 培 养 基 实 验 所 用 的 菌 种 取 自 湖 北 大 冶 铜 山 口 铜 矿 排 水 沟 的 土 壤 和 矿 坑 水 中 ， 经 筛 选 、 纯 化 分 离 后 所 得 。 微 生 物 学 鉴 定 分 析 结 果 表 明 ， 该 浸 矿 菌 主 要 为 嗜 酸 氧 化 亚 铁 硫 杆 菌 ， 记 做 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 ， 其 最 佳 培 养 条 件 ： 初 始 ｐＨ 值 ２． ０， 摇 床 温 度 ３０ ℃、 转 速 １６０ ｒ／ ｍｉｎ， 采 ［ 矿 浸 出 的 影 响 ， 研 究 表 明 复 合 诱 变 菌 的 浸 矿 效 果 最 ［ ６］ 。 通 常 ， 复 合 诱 变 的 方 式 有 ： ①两 种 或 两 种 以 好 董 颖 博 （ １９８３— ） ， 女 ， 博 士 后 ， １０００８３ 北 京 市 海 淀 区 学 院 路 。 上 的 诱 变 因 素 同 时 使 用 ， 国 内 有 很 多 成 功 的 经 验 ， 例 如 杭 州 制 药 厂 将 土 霉 素 生 产 菌 的 孢 子 经 紫 外 线 与 ５ · ２１８· 矿 物 工 程 与 技 术 ８ 用 改 进 型 ９ Ｋ 培 养 基 ， 其 组 成 见 表 １。 表 １ꢀ ９ Ｋ 培 养 基 组 分 及 含 量 为 １． ０ × １０ ｃｅｌｌ· ｍＬ － １ ） ， 矿 浆 浓 度 为 ５％ ， 置 于 ３０ ｇ／ Ｌ ＦｅＳＯ４ ℃ 、 １６０ ｒ／ ｍｉｎ 的 空 气 浴 恒 温 摇 床 内 振 荡 培 养 ， 定 期 ＭｇＳＯ４ 测 定 浸 出 液 中 活 菌 数 目 、 ｐＨ 值 、 氧 化 还 原 电 位 和 组 分 （ ＮＨ ） ＳＯ ＫＣｌ ０． １ Ｋ ＨＰＯ Ｃａ（ ＮＯ ） ３ · ７Ｈ２ Ｏ ４ ２ ４ ２ ４ · ７Ｈ２ Ｏ ０． ５ ２ ＋ Ｃｕ 浓 度 。 蒸 发 掉 的 水 分 用 蒸 馏 水 补 足 ， 取 样 消 耗 含 量 ３． ０ ０． ５ ０． ０１ ４４． ２ 的 液 量 用 相 应 的 溶 液 补 充 ， 使 锥 形 瓶 内 溶 液 至 １００ ｍＬ 刻 度 线 。 在 尾 矿 浸 出 试 验 前 ５ ｄ， 定 时 定 量 加 入 １ ． ２ꢀ 尾 矿 样 品 试 验 尾 矿 样 取 自 湖 北 大 冶 铜 山 口 尾 矿 ， 平 均 铜 １ ０％ 的 稀 硫 酸 调 节 浸 出 体 系 的 ｐＨ， 使 其 稳 定 在 适 合 品 位 为 ０． ２％ ， 尾 矿 ＸＲＤ 衍 射 图 谱 见 图 １， 结 果 表 明 ， 尾 矿 中 主 要 含 有 石 英 、 方 解 石 和 白 云 石 等 矿 物 ， 铜 矿 物 含 量 较 低 。 主 要 含 铜 矿 物 成 分 为 黄 铜 矿 ， 另 有 微 量 的 铜 蓝 ， 铁 矿 物 主 要 为 黄 铁 矿 。 尾 矿 粒 度 分 析 结 果 见 表 ２， 其 中 － ０． ０７４ ｍｍ 粒 级 占 １３． ４１％ 。 尾 矿 中 的 含 铜 矿 物 嵌 布 粒 度 细 ， 部 分 包 裹 在 黄 铁 矿 中 ， 其 粒 径 为 ０． ００４ ～ ０． ０２ ｍｍ， 部 分 与 脉 石 矿 物 连 生 ， 粒 度 一 般 为 ０． ００５ ～ ０． ０１ ｍｍ。 菌 种 生 长 的 范 围 内 ， 共 补 加 ５ ｍＬ。 １ ． ５ꢀ 测 试 分 析 方 法 菌 种 培 养 驯 化 时 期 ， 反 映 细 菌 的 生 长 情 况 和 氧 化 活 性 的 指 标 有 ： Ｆｅ２ ＋ 氧 化 率 、 细 菌 浓 度 、 氧 化 还 原 电 位 ； 细 菌 浸 矿 过 程 中 ， 主 要 的 评 价 指 标 有 ： 铜 离 子 的 浸 出 率 和 浸 出 时 间 、 浸 出 体 系 的 氧 化 还 原 电 位 和 ｐＨ 值 变 化 等 。 具 体 测 试 分 析 方 法 为 ： 亚 铁 离 子 的 浓 ２ ＋ 度 采 用 重 铬 酸 钾 滴 定 法 测 定 ； Ｃｕ 浓 度 采 用 原 子 吸 收 光 谱 法 测 定 ； ｐＨ 值 采 用 ＰＨＳ２Ｆ 型 ｐＨ 计 测 定 ； 用 铂 － 甘 汞 复 合 电 极 在 ＰＨＳ２Ｆ 型 ｐＨ 计 的 电 位 档 测 定 氧 化 还 原 电 位 ； 培 养 液 和 浸 出 液 中 细 菌 数 目 采 用 血 球 计 数 板 测 定 ； 菌 种 的 氧 化 活 性 用 细 菌 氧 化 亚 铁 的 能 力 来 表 示 。 表 ２ꢀ 尾 矿 样 粒 度 分 析 结 果 含 量 ／ ％ 粒 级 ／ ｍｍ 累 计 ／ ％ ＋ ０． ２４５ ４７． ７２ ２１． ５ １０ ４７． ７２ ６９． ２２ ７９． ２２ ８６． ５７ ８８． ０８ ９９． ９８ － － － － ０． ２４５ ＋ ０． １６５ ０． １６５ ＋ ０． １０６ ０． １０６ ＋ ０． ０７４ ０． ０７４ ＋ ０． ０４７ ７． ３５ １． ５１ １１． ９ － ０． ０４７ ２ꢀ 结 果 和 讨 论 WWW.KY ２ 1 ． １ꢀ 1 复 合 诱 4 变 菌 . 的 C 培 养 N 菌 种 诱 变 处 理 必 然 破 坏 原 有 ＤＮＡ 结 构 的 稳 定 性 ， 使 突 变 位 点 可 能 处 于 亚 稳 定 状 态 ， 增 加 了 回 复 突 变 或 抑 制 基 因 突 变 的 概 率 。 为 保 证 突 变 体 的 稳 定 性 ， 在 育 种 过 程 中 作 一 段 长 期 的 培 养 和 观 测 ， 反 复 传 代 观 测 其 性 状 稳 定 性 。 将 经 微 波 处 理 ６０ ｓ、 化 学 药 剂 盐 酸 羟 胺 浓 度 １％ 条 件 下 所 得 诱 变 菌 在 接 种 转 代 培 养 ３ 次 后 ， 在 ９Ｋ 培 养 基 中 进 行 培 养 ， 初 始 细 菌 浓 图 １ꢀ 尾 矿 ＸＲＤ 衍 射 谱 Ｑ— Ｑｕａｒｔｚ； Ｃ— Ｃａｌｃｉｔｅ； Ｄ— Ｄｏｌｏｍｉｔｅ； Ｏ— Ｏｒｔｈｏｃｌａｓｅ； Ｃｐ — Ｃｈａｌｃｏｐ ｙｒｉｔｅ ８ － １ 度 均 为 １． ０ × １０ ｃｅｌｌ· ｍＬ ， 定 时 测 定 培 养 体 系 的 １ ． ３ꢀ 菌 种 复 合 诱 变 试 验 ２ ＋ ｐＨ、 Ｅｈ、 Ｆｅ 氧 化 率 以 及 细 菌 数 目 ， 并 与 诱 变 前 的 原 将 纯 化 后 的 菌 液 放 在 微 波 炉 中 进 行 诱 变 选 育 ， 取 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 液 样 １０ ｍＬ 于 直 径 ９０ ｍｍ 培 养 皿 中 ， 采 用 最 大 功 率 ７００ Ｗ、 脉 冲 频 率 为 ２ ４５０ ＭＨｚ， 时 间 始 菌 活 性 作 对 比 。 ｐＨ 是 细 菌 生 长 繁 殖 非 常 重 要 的 参 数 １０］ 。 复 合 诱 变 菌 在 培 养 过 程 中 ， 培 养 液 ｐＨ、 氧 化 还 原 电 位 （ Ｅｈ） 随 时 间 变 化 见 图 ２， 结 果 显 示 ， ｐＨ 均 呈 先 升 高 后 逐 渐 略 微 下 降 的 趋 势 。 这 是 因 为 ， 在 培 养 初 期 ， 培 养 液 中 的 主 要 反 应 为 Ｆｅ２ ＋ 的 氧 化 ， 细 菌 的 参 与 促 进 了 该 反 应 加 速 进 行 ， 从 而 导 致 ｐＨ 快 速 升 高 １１］ ； 随 ［ ６ ０ ｓ。 将 微 波 处 理 后 的 菌 种 进 行 化 学 诱 变 培 养 ， 采 用 ２５０ ｍＬ 锥 形 瓶 ， 分 别 装 入 ９０ ｍＬ 含 １． ０％ 盐 酸 羟 胺 的 ９ Ｋ 培 养 基 ， 然 后 接 入 １０ ｍＬ 微 波 诱 变 菌 液 进 行 培 养 ， 诱 变 处 理 在 生 长 过 程 中 进 行 ， 诱 变 菌 经 ３ 次 转 代 培 养 后 ， 对 其 活 性 和 浸 铜 效 率 进 行 考 察 。 ［ ３ ＋ ３ ＋ 着 培 养 时 间 的 延 长 ， Ｆｅ 离 子 增 多 ， Ｆｅ 发 生 水 解 ［ １２］ 使 培 养 体 系 酸 度 增 加 ， ｐＨ 有 所 下 降 。 同 时 可 以 １ ． ４ꢀ 含 铜 尾 矿 浸 出 试 验 尾 矿 浸 出 试 验 均 在 ２５０ ｍＬ 锥 形 瓶 中 进 行 ， 内 装 入 ９０ ｍＬ 已 灭 菌 ｐＨ 值 为 ２． ０ 的 稀 硫 酸 溶 液 ， 接 入 看 出 ， 培 养 液 的 Ｅｈ 呈 现 逐 渐 升 高 ， 达 到 最 高 值 后 ， １ ０ ｍＬ 对 数 生 长 期 原 始 菌 或 诱 变 菌 液 （ 细 菌 浓 度 均 维 持 在 相 对 稳 定 的 范 围 内 。 · ２１９· 中 国 采 选 技 术 十 年 回 顾 与 展 望 定 量 的 稀 硫 酸 ， 使 浸 矿 体 系 的 ｐＨ 又 迅 速 下 降 ， 同 时 浸 出 一 段 时 间 后 部 分 氧 化 分 解 的 硫 化 矿 所 产 生 的 硫 被 细 菌 氧 化 为 硫 酸 ， Ｆｅ３ ＋ 发 生 水 解 以 及 黄 钾 铁 钒 沉 淀 的 生 成 使 浸 矿 体 系 酸 度 增 加 ， 从 而 使 浸 出 液 的 ｐＨ ２ ＋ 值 有 所 降 低 。 Ｅｈ 随 着 浸 矿 体 系 中 Ｆｅ 的 氧 化 逐 渐 上 升 达 到 最 高 值 ， 最 终 会 维 持 在 相 对 稳 定 的 范 围 内 。 图 ２ꢀ 复 合 诱 变 菌 培 养 过 程 培 养 液 ｐＨ 和 Ｅｈ 随 时 间 的 变 化 ■ ▲ — ｐＨ； — Ｅｈ 图 ５ꢀ 复 合 诱 变 菌 浸 矿 体 系 中 ｐＨ 和 Ｅｈ 随 浸 出 时 间 的 变 化 ■ ▲ — ｐＨ； — Ｅｈ 图 ３ꢀ 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 在 培 养 过 程 中 的 Ｆｅ２ ＋ 氧 化 率 ■ ▲ — 原 始 菌 ； — 诱 变 菌 WWW.KY114.CN ▲ — 原 始 菌 ； — 诱 变 菌 图 ６ꢀ 不 同 菌 种 在 浸 矿 体 系 中 的 生 长 曲 线 ◆ 图 ４ꢀ 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 的 生 长 曲 线 ◆ ▲ — 原 始 菌 ； — 诱 变 菌 图 ３ 和 图 ４ 分 别 为 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 在 培 养 ２ ＋ 过 程 中 Ｆｅ 氧 化 率 变 化 情 况 和 生 长 曲 线 ， 从 图 中 可 以 看 出 复 合 诱 变 菌 的 氧 化 活 性 和 生 长 情 况 好 于 原 始 菌 。 培 养 ８ ｈ 后 ， 亚 铁 氧 化 率 开 始 快 速 上 升 ， ２４ ｈ 时 已 达 到 １００％ ； 而 原 始 菌 在 培 养 ４０ ｈ 后 ， 亚 铁 氧 化 率 才 接 近 １００％ ， 比 复 合 诱 变 菌 之 后 了 １６ ｈ； 从 生 长 曲 线 也 可 以 看 出 ， 复 合 诱 变 菌 比 原 始 菌 生 长 速 度 快 、 生 长 繁 殖 好 。 由 此 说 明 ， 复 合 诱 变 效 果 很 好 ， 大 大 提 高 了 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 的 氧 化 活 性 。 图 ７ꢀ 不 同 菌 种 对 尾 矿 中 铜 的 浸 出 效 果 ◆ ▲ — 原 始 菌 ； — 复 合 诱 变 菌 图 ６ 为 微 波 － 化 学 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 在 含 铜 尾 矿 浸 出 体 系 中 的 生 长 情 况 ， 图 ７ 对 比 了 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 浸 出 铜 尾 矿 的 效 果 。 结 果 表 明 ， 复 合 诱 变 菌 在 浸 出 尾 矿 过 程 中 的 生 长 比 原 始 菌 有 所 加 快 ， 在 浸 出 １８ ｄ 后 ， 菌 种 生 长 浓 度 相 差 约 ０． ５ 个 数 量 级 ， 从 而 说 明 菌 种 Ａｔ． ｆＬＤ１ 经 复 合 诱 变 后 在 浸 出 尾 矿 过 程 中 的 生 长 情 况 良 好 ， 能 很 好 的 适 应 尾 矿 浸 出 环 境 。 在 浸 出 前 ５ ｄ 内 ， 复 合 诱 变 菌 和 原 始 菌 浸 出 ２ ． ２ꢀ 复 合 诱 变 菌 对 含 铜 尾 矿 的 浸 出 效 果 采 用 复 合 诱 变 后 的 Ａｔ． ｆＬＤ１ 菌 株 进 行 含 铜 尾 矿 浸 出 试 验 ， 浸 出 体 系 ｐＨ 和 Ｅｈ 随 时 间 的 变 化 情 况 见 图 ５。 结 果 表 明 ， 浸 矿 体 系 ｐＨ 均 呈 先 快 速 上 升 后 下 降 最 终 保 持 稳 定 的 趋 势 ， 初 期 ｐＨ 值 上 升 主 要 是 因 为 尾 矿 中 碱 性 矿 物 溶 解 耗 酸 所 致 ， 之 后 补 加 了 一 · ２２０· 矿 物 工 程 与 技 术 ｏｌｅａｃｈｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ［ Ｊ］ ． Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｎｏｎｆｅｒｒｏｕｓ Ｍｅｔａｌｓ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎａ， ２０１１， ２１（ ６） ： １３８３１３８７． 尾 矿 的 铜 浸 出 率 均 有 较 大 幅 度 提 高 ， 分 析 原 因 为 ： 浸 矿 初 期 ｐＨ 较 高 ， 不 利 于 菌 种 生 长 ， 需 定 时 补 加 一 定 量 的 稀 硫 酸 ， 所 以 酸 起 了 主 导 作 用 ， 菌 种 起 辅 助 作 用 。 ５ ｄ 之 后 停 止 补 加 酸 ， 当 浸 出 ３０ ｄ 时 ， 原 始 菌 的 铜 浸 出 率 为 ２６％ ， 而 复 合 诱 变 菌 的 铜 浸 出 率 为 ［ ４］ ꢀ Ａｋｃｉｌ Ａ． ， Ｃｉｆｔｃｉ Ｈ． ， Ｄｅｖｅｃｉ Ｈ． Ｒｏｌｅ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｐｕｒｅ ａｎｄ ｍｉｘｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ｍｅｓｏｐｈｉｌｅｓ ｉｎ ｂｉｏｌｅａｃｈｉｎｇ ｏｆ ａ ｐｙｒｉｔｉｃ ｃｈａｌｃｏｐｙ ｒｉｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ［ Ｊ］ ． Ｍｉｎｅｒａｌｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００７， ２０ （ ３ ） ： ３１０ ３１８． ［ ［ ５］ ꢀ 李 永 智 ， 汪 ꢀ 苹 ， 廖 小 红 ， 等 ． 好 氧 反 硝 化 菌 的 化 学 — 物 理 法 诱 变 育 种 研 究 ［ Ｊ］ ． 环 境 科 学 与 技 术 ， ２０１０， ３３（ ３） ： １４１７． ６］ ꢀ Ｌｅｘｉａｎ Ｘ． ， Ｊｉａ Ｚ． ， Ｊｉａｎｌａｎ Ｄ． ， ｅｔ ａｌ． Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｉｎ ｄｕｃｅｄ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ａｃｉｄｉｏｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｄｕｓ ｉｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｓｐｈａｌｅｒｉｔｅ［ Ｊ］ ． Ｍｉｎｅｒａｌｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００７， ２０ （ １４ ） ： １３２３ ３ ４． ２％ ， 可 以 得 出 ： 当 ｐＨ 相 对 稳 定 停 止 补 加 酸 后 ， 细 菌 的 作 用 占 主 导 地 位 ， 同 时 ， 复 合 诱 变 菌 的 浸 铜 效 率 相 对 于 原 始 菌 提 高 了 ３１． ５％ ， 到 达 浸 出 终 点 的 时 间 比 原 始 菌 提 前 了 ５ ～ ８ ｄ， 说 明 复 合 诱 变 菌 浸 出 含 铜 尾 矿 的 性 能 得 到 了 较 大 提 高 。 １ ３２６． ［ ［ ７］ ꢀ 董 颖 博 ， 林 ꢀ 海 ， 傅 开 彬 ， 等 ． 细 菌 化 学 诱 变 育 种 及 对 低 品 位 铜 尾 矿 的 浸 出 ［ Ｊ］ ． 北 京 科 技 大 学 学 报 ， ２０１１， ３３（ ５） ： ５３２５３８． ８］ ꢀ Ｙｉｎｇｂｏ Ｄ． ， Ｈａｉ Ｌ． ， Ｈａｎ Ｗ． ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ ｉｒｒａｄｉａ ｔｉｏｎ ｏｎ ｂａｃｔｅｒｉａ ｍｕｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｌｅａｃｈｉｎｇ ｏｆ ｌｏｗｇｒａｄｅ ｃｏｐｐｅｒ ｔａｉｌ ｉｎｇｓ［ Ｊ］ ． Ｍｉｎｅｒａｌｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２０１１， ２４（ ８） ： ８７０８７５． ３ ꢀ 结 ꢀ 论 （ １） 在 微 波 处 理 ６０ ｓ、 盐 酸 羟 胺 浓 度 １％ 时 所 得 复 合 诱 变 菌 的 氧 化 活 性 大 大 提 高 ， 在 ９ Ｋ 培 养 基 中 培 养 ２４ ｈ 时 ， 亚 铁 氧 化 率 已 接 近 １００％ ， 比 原 始 菌 提 前 １６ ｈ， 并 且 促 进 了 其 生 长 繁 殖 ， 诱 变 效 果 良 好 。 ［ ９］ ꢀ Ｙｉｎｇｂｏ Ｄ． ， Ｈａｉ Ｌ． ， Ｘｉａｏｌａｎ Ｍ． ， ｅｔ ａｌ． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｃｉｄｉｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｒｏｏｘｉｄａｎｓ ｂｙ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｂｉ ｏｌｅａｃｈｉｎｇ ｏｆ ｌｏｗｇｒａｄｅ ｃｏｐｐｅｒ ｔａｉｌｉｎｇｓ［ Ｃ］ ． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒ ｅｎｃｅ ｏｎ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ， Ｃｉｖｉｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， （ ２） 微 波 － 化 学 复 合 诱 变 菌 在 浸 出 尾 矿 体 系 中 生 长 情 况 良 好 ， 浸 出 ３０ ｄ 时 ， 铜 浸 出 率 为 ３４． ２０％ ， 相 对 于 原 始 菌 提 高 了 ３１． ５％ ， 同 时 该 诱 变 菌 具 有 较 高 的 浸 出 速 率 ， 到 达 浸 出 终 点 的 时 间 比 原 始 菌 提 前 了 ５ ～ ８ ｄ， 说 明 复 合 诱 变 菌 浸 出 含 铜 尾 矿 的 性 能 得 到 了 很 大 提 高 。 ２ ０１１： ４３４４４３４７． ［ ［ １０］ ꢀ Ｒｏｈｗｅｒｄｅｒ Ｔ． ， Ｇｅｈｒｋｅ Ｔ． ， Ｋｉｎｚｌｅｒ Ｋ． ， ｅｔ ａｌ． Ｂｉｏｌｅａｃｈｉｎｇ ｒｅ ｖｉｅｗ ｐａｒｔ Ａ： ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｂｉｏｌｅａｃｈｉｎｇ： ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａ ｎｉｓｍｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｍｅｔａｌ ｓｕｌｆｉｄｅ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ［ Ｊ］ ． Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ２００３， ６３（ ３） ： ２３９２４８． 参 ꢀ 考 ꢀ 文 ꢀ 献 １１］ ꢀ 夏 乐 先 ， 彭 安 安 ， 郭 ꢀ 雪 ， 等 ． 两 株 不 同 来 源 的 嗜 酸 氧 化 亚 铁 WWW.KY114.CN 硫 杆 菌 对 黄 铜 矿 浸 出 的 研 究 ［ Ｊ］ ． 现 代 生 物 医 学 进 展 ， ２００９， ９ ［ ［ ［ １］ ꢀ 赖 绍 师 ， 覃 文 庆 ， 杨 聪 仁 ， 等 ． 低 品 位 硫 化 铜 矿 的 细 菌 浸 出 ［ Ｊ］ ． （ ６） ： １０６８１０６９． 中 国 有 色 金 属 学 报 ， ２０１１， ２１（ ６） ： １４７３１４７９． ［ １２］ ꢀ 周 洪 波 ， 谢 英 剑 ， 张 汝 兵 ， 等 ． 中 度 嗜 热 混 合 菌 在 搅 拌 槽 中 浸 出 黄 铜 矿 及 其 群 落 动 态 ［ Ｊ］ ． 中 南 大 学 学 报 （ 自 然 科 学 版 ） ， ２］ ꢀ 柳 建 设 ， 夏 海 波 ， 王 海 东 ． 低 品 位 硫 化 铜 矿 细 菌 浸 出 ［ Ｊ］ ． 中 国 有 色 金 属 学 报 ， ２００４， １４（ ２） ： ２８６２９０． ２ ０１０， ４１（ １） ： １５１９． ３］ ꢀ Ｓｈｏｕｐｅｎｇ Ｌ． ， Ｎｉｎｇ Ｇ． ， Ｈａｉｙａｎ Ｗ． ， ｅｔ ａｌ． Ｈｉｇｈ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｘｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｓｈｉｆｔ ｆｏｒ ｂｉ （ 收 稿 日 期 ꢀ ２０１２０６０４） 櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘櫘 （ 上 接 第 ２１７ 页 ） 菱 铁 矿 的 影 响 。 获 得 的 结 论 如 下 ： 参 ꢀ 考 ꢀ 文 ꢀ 献 （ １） 十 二 胺 体 系 中 ， ｐＨ 值 小 于 １０ 时 淀 粉 对 假 ［ ［ ［ ［ １］ ꢀ 邵 安 林 ． 东 鞍 山 高 碳 酸 盐 铁 矿 石 磁 选 精 矿 浮 选 工 艺 研 究 ［ Ｊ］ ， 象 赤 铁 矿 和 磁 铁 矿 有 较 强 烈 的 抑 制 作 用 ， 在 酸 性 及 中 性 条 件 下 对 石 英 有 抑 制 作 用 ， 可 在 ｐＨ 值 １０ 左 右 时 反 浮 选 分 离 铁 矿 物 和 石 英 。 金 属 矿 山 ， ２０１１： （ １０） ： ７９８２． ２］ ꢀ 李 丽 匣 ， 印 万 忠 ， 冯 ꢀ 丹 ， 等 ． 油 酸 钠 体 系 下 铁 矿 物 及 石 英 的 浮 选 性 能 ［ Ｊ］ ． 金 属 矿 山 ， ２０１１（ ８） ６８７１． （ ２） 菱 铁 矿 加 入 假 象 赤 铁 矿 和 石 英 以 及 磁 铁 矿 ３］ ꢀ 陈 ꢀ 达 ， 葛 英 勇 ， 余 永 富 ． 磁 选 铁 精 矿 再 提 纯 反 浮 选 工 艺 和 药 剂 的 研 究 ［ Ｊ］ ． 矿 产 保 护 与 利 用 ， ２００５（ ４） ： ４６５０． ４］ ꢀ 《 选 矿 手 册 》 编 委 会 ． 选 矿 手 册 ［ Ｍ］ ． 北 京 ： 冶 金 工 业 出 版 社 ， 和 石 英 的 混 合 矿 中 时 ， 均 会 大 大 恶 化 浮 选 效 果 。 这 是 由 于 微 细 粒 的 菱 铁 矿 吸 附 和 石 英 表 面 ， 改 变 了 其 表 面 性 质 ， 受 到 淀 粉 抑 制 而 进 入 到 精 矿 中 ， 使 精 矿 的 铁 品 位 降 低 。 因 此 ， 在 含 有 菱 铁 矿 的 赤 （ 磁 ） 铁 矿 石 中 ， 若 要 实 现 矿 石 的 有 效 分 选 ， 必 须 首 先 消 除 微 细 粒 ２ ００６． （ 收 稿 日 期 ꢀ ２０１２０４２８） · ２２１·